Cromatografía líquida de alta eficacia

alt=Hplc column|miniaturadeimagen|Columna HPLC (cilindro metálico) montada en un sistema cromatográfico La cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) (por sus siglas en inglés de ''High PerformanceLiquid Chromatography''), es una modalidad de cromatografía líquida en columna que se caracteriza por el empleo de rellenos de fase estacionaria de reducido tamaño de partícula (de hasta 3 μm), con lo que se consigue una mejora sustancial en la eficacia separativa, tanto en lo que a resolución de los solutos se refiere, como en lo relativo al tiempo empleado en el análisis, por lo que también se denomina, alternativamente, cromatografía líquida de alta resolución. Dada la importante mejora en las prestaciones, esta modalidad de cromatografía líquida no precisa de largas columnas, siendo lo habitual que estas no excedan de los 25 cm de longitud. Respecto al diámetro de las columnas, estas también son mas estrechas que las utilizadas en la modalidad clásica (de 2 a 5 mm de diámetro interno). Esta modalidad de cromatografía es de uso frecuente en el análisis químico y bioquímico.

El empleo de columnas estrechas con rellenos de fase estacionaria de pequeño diámetro de partícula implica una mayor resistencia al paso del eluyente a través de la fase estacionaria, por lo que es necesario emplear elevadas presiones, que pueden llegar a alcanzar las 450 atm (45 MPa) con el fin de obtener caudales constantes de 0,5 a 5 mL/min, es por ello que, a veces, a esta modalidad de cromatografía se le denomina cromatografía líquida de alta presión. proporcionado por Wikipedia